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搜索结果: 1-15 共查到农学 ISSR- PCR相关记录23条 . 查询时间(0.148 秒)
为明确宁夏马铃薯镰刀菌根腐病病原菌种内的遗传差异与亲缘关系,利用ISSR-PCR技术对影响PCR扩增效果的因素和ISSR引物进行优化和筛选,建立适合马铃薯镰刀菌根腐病病原菌的ISSR-PCR反应体系,并通过ISSR分子标记技术对30株地理来源不同的镰刀菌进行遗传多样性分析。结果显示:马铃薯镰刀菌根腐病病原菌的ISSR-PCR扩增最适引物为807,20 μL反应体系中2×Easy Taq PCR S...
以狭叶坡垒DNA为模板,利用正交试验分别对ISSR-PCR反应的MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq聚合酶浓度、引物浓度、模板DNA浓度进行了优化,并通过梯度PCR确定最佳退火温度和循环次数,最终确定狭叶坡垒最佳反应体系及扩增条件为:25 μL体系中1×PCR buffer,2 mmol/L MgCl2,0.25 mmol/L dNTPs,0.04 U/μL Taq聚合酶,0.2 μmol/L引...
本研究以改良的CTAB法提取的甘肃合作钝裂银莲花(Anemone obtusiloba)基因组DNA为模板,通过正交和单因素试验,探讨引物浓度、聚合酶浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度和模板浓度对银莲花ISSRPCR扩增的影响。结果表明,钝裂银莲花ISSRPCR最佳反应体系:总体积20 μL,模板浓度20 ng,聚合酶2 U,Mg2+浓度2.5 mmol·L-1,dNTPs浓度0.3 mmol...
大豆ISSR-PCR反应体系的优化     大豆  ISSR-PCR  体系优化       2015/9/24
以黑龙江省大豆为材料,利用正交试验设计,对大豆ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(Mg2+、引物、dNTPs、模板DNA量、Taq酶量)在4个水平上进行体系优化。结果确定了大豆ISSR-PCR反应的最佳体系(25 μL)为:Mg2+浓度1.85 mmol·L-1、dNTPs浓度1.2mmol?L-1、引物浓度1.2μmol?L-1、模板DNA60 ng、Taq酶量0.7 U。利用该最佳体系,...
为探索适宜棉花的ISSR-PCR反应体系,采用两轮均匀设计试验,对ISSR-PCR反应体系中Mg2+ 、dNTPs、模板DNA、引物、Taq DNA聚合酶的浓度或用量进行优化。结果表明,棉花20 μL的ISSR反应体系的最佳组分包括2 μL 10×PCR Buffer、0.5 U Taq DNA聚合酶、40 ng模板DNA、0.25 mmol·L-1 dNTPs、0.5 μmol·L-1引物和2....
以花椰菜基因组为材料,对ISSR反应体系中各种影响因子如dNTP浓度,DNA模板含量,Taq DNA聚合酶量浓度,引物用量以及最适退火温度等进行了优化和筛选,建立了适合花椰菜的ISSR反应体系:25μl反应体积, 内含 1×PCR 反应缓冲液(含Mg2+)、0.75U Taq DNA 聚合酶、0.15mmol/L dNTPs、0.5μmol/L 引物、60ng 模板 DNA。 确定了适宜的退火温度...
[目的]为钩距虾脊兰种质资源研究奠定基础。[方法]以钩距虾脊兰为试验材料,利用改良的 CTAB 法提取钩距虾脊兰基因组 DNA,并对影响 ISSR 扩增反应的各因素进行优化。[结果]获得了高质量的钩距虾脊兰基因组 DNA;同时,建立了最适的钩距虾脊兰 ISSRPCR 体系,即25 μl PCR 反应体积中,2.5 μl 10×PCR buffer,2.0 mmol/L MgCl2,100 ng...
[目的]针对蕺菜ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR分子指纹标记反应体系,为进一步研究蕺菜的居群遗传多样性奠定基础。[方法]通过筛选引物并设定影响蕺菜ISSR反应各因素的浓度,检测ISSR不同反应体系的扩增效果;通过分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立蕺菜ISSR稳定可靠的反应体系。[结果]建立了可用于蕺菜ISSRPCR分析的最适宜反应体系。Taq酶质量、退火温度、Mg2...
黄皮ISSRPCR反应体系的优化     黄皮  ISSR-PCR  优化       2009/10/14
采用单因素和正交试验对ISSR-PCR扩增黄皮基因组DNA的主要影响因子进行筛选和分析,建立了适宜于黄皮ISSR分析的扩增体系:20 μL的反应体系中含30 ng的模板DNA、1.5 U TaqDNA聚合酶、0.4 μmol/L引物、0.3mmol/L dNTPs以及引物(gA)8C的最佳退火温度为52.4℃。
[目的]确定适应青海云杉ISSRPCR反应的最佳反应体系。[方法]以青海云杉(Picea crassifolia kom.)为材料,对影响其ISSRPCR扩增结果的各因素(Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、模板DNA、引物、退火温度)进行筛选和优化。[结果]青海云杉ISSRPCR最佳反应体系为在20 μl反应体系中包含1 μl 10×buffer,1.5 mmol/L的Mg...
[ 目的] 建立与优化送春与多花兰杂种ISSR- PCR 的反应体系。[ 方法] 用CTAB 法提取送春、多花兰和送春×多花兰杂种的基因 组DNA, 针对ISSR-PCR 扩增的体系中的Taq 酶浓度、Mg2 + 浓度、dNTP 浓度和引物的用量4 个因素, 进行L9(43) 正交试验, 用引物UBC827扩增两亲本的混合DNA, 所得PCR 产物在琼脂糖凝胶上检测, 同时针对去离子甲酰胺对反应...
[ 目的] 建立及优化松江鲈鱼ISSR-PCR 的反应体系。[ 方法] 采用ISSR-63 引物, 通过正交试验设计, 分别对Taq DNA 聚合酶、 Mg2 + 、dNTPs 和引物浓度等4 种PCR 原料进行优化, 以确立松江鲈鱼的ISSR- PCR 反应最佳体系, 并通过温度梯度PCR , 筛选适宜的退火温度。[ 结果] 确定了松江鲈鱼的最适ISSR-PCR 反应体系,20 μl 反应体...
为进一步从分子水平上研究春兰种群的遗传多样性奠定基础。[ 方法] 以春兰基因组DNA 为模板, 通过单因子试验研究 ISSR 反应体系中主要成分对扩增结果的影响, 以寻找适合春兰ISSR 分析的反应体系。[ 结果] 春兰的ISSR 反应体系较适宜的扩增条件 为:25 μl PCR 反应体积中,15 .78 μl 双蒸水,2 .5 μl 1 ×CR buffer ,1 .1 U Taq DNA ...
[目的]利用ISSR技术对贵州石笔木的遗传多样性进行分析。[方法]以贵州石笔木种子、新鲜叶片和干燥叶片为试材,采用改良的CTAB法和SDS法提取贵州石笔木基因组DNA,并对提取DNA的浓度和纯度进行测定。通过单因子梯度试验,筛选出优化、稳定的ISSR-PCR反应体系。[结果] 利用CTAB法和SDS法从石笔木叶片中提取DNA时,鲜叶和干燥叶片提取的DNA质量和浓度略有差别,CTAB法提取的浓度稍大...
[ 目的] 寻找一个可用于温郁金ISSR- PCR 的最适宜反应体系。[ 方法] 利用CTAB 法提取基因组DNA , 同时利用PCR 扩增技术和 方法, 对引物、模板DNA、Mg2 + 、dNTP、Taq 聚合酶等反应条件进行优化。[ 结果] 反应体系的最佳条件是总体积为25 μl , 其中Mg2 + 浓度(25mmol/ L) 2 .2 μl , Taq 聚合酶( 5 U/ μl)0 .4...

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