搜索结果: 1-9 共查到“兽医科学基础学科 RT-PCR”相关记录9条 . 查询时间(0.14 秒)
绵羊MC4R基因的半定量RT-PCR及生物信息学分析
黑素皮质素受体-4 基因克隆 半定量RT-PCR 生物信息学
2013/12/6
本研究旨在对绵羊MC4R基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考牛MC4R基因序列设计引物，采用PCR技术克隆绵羊MC4R基因序列，并利用半定量RT-PCR进行组织表达谱分析；同时对其进行生物信息学分析。结果表明，克隆的绵羊MC4R基因全长1 919 bp，含有999 bp的完整CDS编码区，编码332个氨基酸。其CDS编码区的核苷酸序列与牛、人、猪、大鼠、小鼠MC4R 基因对应序列的同源性分别为...
应用兼并引物RT-PCR快速检测及鉴别气载鸡新城疫病毒
鸡场 气载新城疫病毒 逆转录聚合酶链反应 检测
2009/9/8
为了快速检测并鉴别鸡舍内外空气中的新城疫病毒（NDV），应用AGI30气体收集器在一大型商品肉鸡舍舍内外收集气体，同时采集鸡的气管和泄殖腔拭子，采用兼并引物RTPCR检测气体样品和拭子中的NDV，并鉴别NDV的毒力；同时分离、纯化气体样品中的NDV，用常规毒力学试验鉴别分离株的毒力。结果RTPCR检测到舍内2/15的气体样品和4/15的拭子中同时有强毒和弱毒株,3/15气体样品和13/15的...
蒙古绵羊瘤胃固、液相附着微生物的RT-PCR检测
Real-time PCR 蒙古绵羊 瘤胃 微生物 生态分布
2009/8/31
【目的】应用Real-time PCR（RT-PCR）对蒙古绵羊瘤胃内容物固、液相附着微生物的生态分布进行定量研究。【方法】采集3只蒙古绵羊瘤胃内容物,固液分离后对各相中所附着的微生物进行定量检测,包括总细菌、总厌氧真菌和3种主要纤维降解菌－白色瘤胃球菌Ruminococcus albus、黄色瘤胃球菌Ruminococcus flavefaciens、产琥珀酸拟杆菌Fibrobacter suc...
荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平
荧光定量RT-PCR 鸡 CD4 CD8 mRNA
2008/12/1
白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法，并采用该方法对26～50日龄商品鸡外周血淋巴细胞（PBL）中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示：所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%；线...
TaqMan荧光定量RT-PCR检测猪脂蛋白酯酶mRNA方法的建立
猪 脂蛋白酯酶 实时定量RT-PCR TaqMan荧光探针
2008/10/27
【目的】克隆猪cDNA，作为猪LPL mRNA定量检测的标准品，建立检测方法。【方法】用RT-PCR，从猪背最长肌的总RNA中逆转录扩增LPL的cDNA，将纯化的LPL cDNA与pGM-T载体进行连接,转化宿主菌TOP10，提取重组质粒DNA，PCR鉴定并测序分析,对质粒标准进行实时荧光定量PCR 检测。纯化质粒并检测260 nm吸光度,确定原液的重组质粒拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度...
定量检测瘤胃纤维降解细菌的RT-PCR法
瘤胃纤维降解菌 RT-PCR 定量
2008/10/13
【目的】建立一种适用于瘤胃主要纤维降解细菌的RT-PCR定量检测方法，通过培养技术监测瘤胃纤维降解细菌在不同环境下的数量变化，为深入研究反刍动物瘤胃发酵机理以及对纤维素资源的有效利用提供技术支持。【方法】分别以Fibrobacter succinogenes、Ruminococcus flavefaciens与Ruminococcus albus 的16SrDNA为靶序列设计相应的引物，建立SYB...
运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少1个81bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过1对引物,进行1次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照。为应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖代谢过程中PC基因mRNA水平奠定方法学基础。
【目的】探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化。【方法】根据HSP90、HSP70和GAPDH mRNA序列，设计并合成引物，将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体，重组质粒经筛选、鉴定，体外转录出RNA，梯度稀释作为阳性模板，用于标准曲线的制定和样品检测，建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台，并用于检测长途运输猪心脏和肝脏中HSP70及HSP90 mRNA转录水平的改变。【结果...