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探讨IL-4对小鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)表面分子CD11c、CD80、CD86表达的影响及其意义。方法 对照组(n=5只,30孔)应用20 ng/ml GM-CSF,实验组(n=5只,30孔)应用20 ng/ml GM-CSF+20 ng/ml IL-4分别刺激小鼠骨髓细胞生长,隔日进行细胞换液,观察并对比细胞形态学变化,流式细胞仪测定DC细胞表面相关分子表达。结果 实验组诱导小鼠骨髓细胞第7...
抗人CD86单链抗体的基因克隆、表达及结合活性分析
抗人CD86单链抗体 基因克隆 结合活性分析
2013/9/17
构建并在CHO细胞中表达抗人CD86单链抗体(CD86-scFv), 研究该抗体与抗原的结合特性及介导的生物学功能。方法 从分泌鼠源CD86抗体的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL基因, 构建含有前导肽L-VH-Linker-VL抗体编码基因的表达载体并转染CHO细胞。经筛选高分泌株并扩大培养后收集上清进行纯化。流式细胞术分析CD86-scFv对不同细胞膜型CD86分子的识别及与鼠源亲本抗体1D1的竞争...
自发性流产小鼠模型主动脉旁淋巴结CD45+CD86+细胞亚群分析
流产 动物模型 淋巴结 淋巴细胞
2009/10/26
目的:检测主动脉旁淋巴结(PLN)CD45+CD86+细胞,用于间接分析小鼠母-胎界面局部免疫状况。 方法: CBA/J×DBA/2、未孕CBA/J雌鼠和CBA/J×BALB/c小鼠分别作为自发性流产模型(A组)、未孕对照(N组)和生育力正常对照(F组)。采用流式细胞术检测CD45+CD86+细胞在CD45+细胞中的百分率(简称CD45+CD86+百分率)和这些细胞的绝对数,其中单个核细胞从孕5....
目的 构建小鼠CD80和CD86基因RNA干扰慢病毒表达载体,并在体外观察其对小鼠骨髓源性树突状细胞(dendritic cell,DC)的作用。方法 针对已经筛选确定的CD80基因RNA干扰有效靶序列,合成靶序列的双链DNA,接入pGCL-GFP载体,再与pHelper1.0和pHelper2.0质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度;同法构建出C...
CD86在大鼠角膜移植排斥反应中的表达及意义
2007/7/25
目前,穿透性角膜移植被公认为是治疗角膜盲、恢复视力的唯一有效的方法[1]。但手术后的排斥反应威胁着角膜植片的成活,是导致手术失败的关键。该反应是一种多因素参与的复杂过程。目前认为局部的抗原提呈细胞提呈同种异体抗原,激活T细胞,诱发免疫反应导致植片排斥[2][3],但其具体机制尚未完全清楚。近年的研究表明:T细胞的完全活化需要2个信号,第1个信号是T淋巴细胞表面的TCR-CD3复合物同抗原提呈细胞上...