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探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶 (apurinic/apyrimidinic endonuclease, APE1)和p53蛋白内源性和外源性相互结合作用。 方法 将重组质粒pET42a-hAPE1转染E.coli BL21(DE3),应用IPTG诱导GST-APE1蛋白表达,鉴定后经金属螯合层析技术纯化,通过Western blot鉴定纯化蛋白,得到GST-APE1融合蛋白。免...
研究FNBP1在HeLa细胞形态控制及生长调控过程中的作用。 方法 运用RT-PCR、Western blot法在mRNA和蛋白水平验证FNBP1在HeLa细胞中的表达;运用RT-PCR、Western blot法检测靶向siRNA干扰HeLa细胞内源FNBP1的表达情况,并于完全沉默和表达恢复2个时相点检测HeLa细胞在细胞形态、细胞周期等方面的变化。 结果 ...
探讨mTOR蛋白与宫颈癌发生、发展过程的相关性及雷帕霉素和mTOR siRNA对宫颈癌细胞中mTOR、4EBP1表达的影响。方法 应用免疫组织化学方法检测正常宫颈鳞状上皮组织、CIN组织和宫颈癌组织中mTOR蛋白的表达情况;应用RNAi技术及雷帕霉素分别处理宫颈癌HeLa细胞,运用原位杂交、免疫细胞化学技术分别检测处理前后HeLa细胞中mTOR、4EBP1 mRNA及蛋白的表达情况。结果 mTOR...
探讨重组人 P53 腺病毒(recombinant human adenovirus-P53,rAd-P53)联合紫杉醇对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。 方法: MTT法检测紫杉醇、rAd-P53单独或联合应用后HeLa细胞的增殖;DAPI染色法检测紫杉醇、rAd-P53单独或联合作用48...
探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)与顺铂(cisplatin,DDP)单独及联合应用对人宫颈癌HeLa细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其可能的机制。 方法: 裸鼠皮下接种HeLa细胞,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组、RAPA组、DDP组、RAPA+DDP组。治疗过程中检测肿瘤的质量、体积,RT-PCR、免疫组化及Western blotting检测低氧诱导因子-1α(h...
观察南蛇藤乙酸乙酯、正丁醇提取物联合抗癌化疗药物对体外培养的人SGC-7901、HeLa细胞增殖的影响。方法 采用MTT法检测不同浓度的南蛇藤乙酸乙酯、正丁醇提取物(15、30、60、120 μg/ml)对SGC-7901、HeLa细胞增殖的抑制率,计算出各自的IC50浓度。用南蛇藤乙酸乙酯、正丁醇提取物IC50浓度分别与紫杉醇5.0 μg/ml、卡铂40.0 μg/ml、环磷酰胺40.0 μg/...
探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)对宫颈癌细胞生物学特性的影响。方法 分离培养脐带MSCs,将MSCs或其条件培养基与宫颈癌细胞Hela共培养,生长曲线、集落形成实验及RTPCR分别检测MSCs细胞或条件培养基对Hela细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响。结果 生长曲线结果显示,MSCs细胞及条件培养液可抑制Hela细胞增殖,并呈现一定的浓度依赖性。集落形成实验结果显示,MSCs条件培养液...
探讨不同浓度雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用及对HIF-1α、VEGF表达的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测分别以不同浓度雷帕霉素处理的体外培养人宫颈癌HeLa细胞的抑制率,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot 法检测各组细胞HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白的表达。结果不同浓度雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞的生长有明显的抑制作用,并呈剂量...
探讨不同浓度雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用及对HIF-1α、VEGF表达的影响。方法采用四甲基偶氮唑 盐(MTT)比色法检测分别以不同浓度雷帕霉素处理的体外培养人宫颈癌HeLa细胞的抑制率,采用反转录-聚合酶链 反应(RT-PCR)、Western blot 法检测各组细胞HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白的表达。结果不同浓度雷帕霉素对宫 颈癌HeLa细胞的生长有明显的抑制作用,并...
探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)对荧光素酶标记的人宫颈癌HeLa-luc细胞的体内外抗肿瘤作用,了解CIK回输荷瘤小鼠后在不同器官的分布特点。 方法: 由健康志愿者外周血单个核细胞体外诱导培养CIK,流式细胞术检测CIK表面分子的表达,RT-PCR法检测IFN-γ mRNA的表达,MTT法和瑞氏-姬姆萨染色测定CIK对HeLa-lu...
构建携带新型放射增敏剂Dbait的乏氧辐射双诱导的重组质粒pcDNA 3.1(+)-HRE-Egr-1-Dbait,探讨乏氧条件下其对宫颈癌HeLa细胞的放射增敏作用, 为Dbait的基因靶向放射增敏治疗提供实验依据。
应用TPX2-siRNA转染Hela细胞,探讨TPX2基因沉默后对Hela细胞增殖和侵袭力及周期分布的影响。方法:合成TPX2特异性的siRNA 4对,随机siRNA阴性对照1对。Lipofectamine 2000介导siRNA转染Hela细胞株。RT-PCR检测转染前后mRNA表达的变化,Western blot检测转染前后蛋白表达的变化,MTT、流式细胞术(FCM)、Transwell小室和...
探讨曲古霉素A(TSA)对宫颈癌HeLa细胞的毒性及放射增敏作用。方法MTT法检测TSA处理宫颈癌HeLa细胞12、24、48、72 h的细胞毒性及TSA作用24 h的10%细胞抑制浓度(10% inhibition concentration,IC10)和半数抑制率IC50对HeLa细胞不同分割放疗方式的增敏效果;克隆形成法分析IC10 的TSA对HeLa细胞放射增敏作用的影响,单击多靶模型拟合...
探讨姜黄素抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖的内在机制。 方法用不同浓度的姜黄素作用HeLa细胞,在作用的不同时间内用MTT法测定姜黄素对HeLa细胞抑制增殖的效应;RT-PCR法检测P53 mRNA的表达;Western blot法检测乙酰化组蛋白H3、乙酰化P53以及P53蛋白的表达。 结果姜黄素对HeLa细胞增殖有明显抑制作用,不仅有剂量依赖性,还存在明显的时间依赖性;而且姜黄素能明显上调HeLa...
目的:比较分析商品天花粉蛋白(TCS1) 和从鲜药材中提取分离出的天花粉蛋白粗品(TCS2),对HepA-H细胞(腹水型肝癌高转移株细胞)和HeLa细胞(人宫颈癌肿瘤细胞)的杀伤作用,并进一步探讨其抑癌作用机理。方法: MTT法检测药物的细胞毒作用,电镜观察细胞超微结构改变,电泳检测细胞DNA生物化学特征改变。结果: TCS1和TCS2对HepA-H细胞作用不明显(P>0.05),而对HeLa细胞...

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