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为研究高抗草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosateN—acetyhransferase,GAT)的草甘膦抗性相关位点,以高抗草甘膦的gatl基因和不具草甘膦抗性的gat2基因为出发基因,通过一轮双基因DNAshuffling,获得了抗性较野生型gatl下降的突变体14个:10个单位点突变,3个双位点突变,1个3位点突变。其中,MTGAT3(H41Q)、MTGAT5($52P)、MTGATT6(1...
一个简便的DNA改组(DNA shuffling)操作程序
DNA改组 重聚 PCR 定向进化
2008/6/16
介绍了一个简便的DNA改组操作程序.首先利用PCR扩增了两段具有高度序列同源性的1 700 bp左右的基因片段,两者相比较同源性大于93%.然后将其等量混合后,在Mg2+存在的条件下,用DNaseⅠ切割成10~50 bp的小片段.这些小片段在不外加引物的前提下,利用PCR反应进行重聚,再将重聚物经过两轮正常的PCR扩增,获得了与原来片段大小相当的基因片段.这一技术有利于从一组序列同源性程度...
期刊信息
篇名
A new approach for rapidly reshaping single-chain antibody in vitro bycombining DNA shuffling with ribosome display.
语种
英文
撰写或编译
作者
Wang XB,Zhou B,Yin CC,Lin Q,Huang HL
第一作者单位
刊物名称
J Biochem (...