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大豆主要过敏原Gly m Bd 30K蛋白单克隆抗体的制备与应用
单克隆抗体 特性鉴定 双抗体夹心法
2015/10/10
利用大豆主要过敏原Gly m Bd 30K蛋白抗原表位蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠，取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。采用半固体培养基法和有限稀释法相结合的方法快速筛选获得稳定分泌的特异性杂交瘤细胞，用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水，应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型；通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体...
利用RT-PCR克隆大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的全长基因，根据序列设计带有酶切位点的特异性引物，扩增大豆Gly m Bd 30K的完整开放阅读框，与pET-28a载体连接，构建原核表达载体。结果表明：克隆了大豆主要过敏原Gly m Bd 30K基因，且构建了其原核表达载体。该基因含有长度为1 140 bp的开放阅读框，编码379个氨基酸。该蛋白质的相对分子质量为42 758，等电点为5...
Fate of a Major Soybean Allergen, Gly m Bd 30K, in Rice-, Barley- and Soybean-Koji Miso (Fermented Soybean Paste) during Fermentation
soybean allergen Gly m Bd 30K hypoallergenic food
2010/11/23
Miso (fermented soybean paste) had been shown to contain negligible or no Gly m Bd 30K, a major soybean allergen, by a sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The fate of the allergen in m...