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目的 研究大肠埃希菌不耐热肠毒素B亚基（LTB）对弓形虫速殖子SAG1-ROP2复合基因免疫效果的影响。 方法 构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-SAG1-ROP2和pEASY-E1-LTB。BALB/c小鼠88只，随机均分为4组，分别用PBS（A组）、 pcDNA3.1空质粒（B组）、 pcDNA3.1-SAG1-ROP2质粒（C组），以及pcDNA3.1-SAG1-ROP2质粒和pE...
目的 制备小鼠抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体，用于早期弓形虫感染的抗原检测。方法 用弓形虫RH株重组抗原SAG1进行常规免疫结合小鼠脾内免疫，杂交瘤技术制备单克隆抗体。ELISA法筛选阳性克隆，经亚克隆建株。诱生腹水法制备抗体，protein-G亲合层析法进行纯化，测定其亚类、效价；Western blot法分析其特异性；夹心-ELISA法检测抗体的敏感性及特异性；检测弓形虫感染小鼠血液循...
吉林株犬新孢子虫SAG1基因片段的克隆及蛋白抗原性预测
犬新孢子虫 克隆 序列分析 抗原性
2009/9/2
［目的］ 对犬新孢子虫SAG1基因进行克隆与序列分析。［方法］ 从细胞培养的吉林株虫体中提取犬新孢子虫DNA，根据已发表的犬新孢子虫SAG1基因的核苷酸序列，设计并合成1对特异性引物，采用PCR技术，扩增犬新孢子虫SAG1基因片段，并成功克隆到pMD18T simple载体上，对经PCR、酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列分析。［结果］ 对犬新孢子虫SAG1基因进行克隆后，获得阳性...
截短形式弓形虫SAG1抗原在大肠杆菌中的可溶性高效表达、纯化及免疫反应性鉴定
大肠杆菌
2007/7/25
刚地弓形虫(Toxoplasma gondii，T.gondii)是一种专性细胞内寄生的机会致病原虫，呈世界性分布，能引起人兽共患的弓形虫病。全世界约1/3人口感染[1]，大多数为隐性感染，但免疫功能低下人群合并弓形虫感染可致严重并发症。调查显示，约20%的AIDS病人患有弓形虫脑病，该病是AIDS病人直接死亡原因之一[2][3]。孕妇在孕期初次感染弓形虫易造成流产、畸胎、死胎等[4]。弓形虫对畜...
弓形虫SAG1基因在大肠杆菌中的高效表达及重组抗原对弓形虫感染的检测
大肠杆菌
2007/7/25
弓形虫是一种寄生在有核细胞内的寄生原虫，可导致免疫功能低下的宿主产生严重疾病，甚至威胁其生命。弓形虫的主要表面抗原1(SAG1，即以前命名的P30)已被证明是一种良好的诊断性和疫苗研制的候选分子[1]。研究表明SAG1是一种高度构象决定性抗原，其抗原活性与蛋白分子的正确折叠密切相关[2][3][4]。许多研究者曾试图用重组DNA技术来获得SAG1，但从大肠杆菌中获得的大部分重组SAG1由于错误折叠...
Gene Cloning of 30 kDa Toxoplasma gondii Tachyzoites Surface An¬tigen (SAG1)
Toxoplasma tachyzoite SAG1 pQE-30 expression vector pTZ57R cloning vector
2010/4/12
Background: Toxoplasma gondii is an obligate intracellular parasite and its sexual and asexual cycles, respectively take place in the intestinal epithelial cell of definitive host and tissue of interm...