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为探索细菌表达目标基因dsRNA介导的RNAi技术是否在家蚕Bombyx mori可行, 本研究引入了在其他物种中广泛应用的细菌表达dsRNA的RNAi系统: HT115细菌株和L4440质粒。利用L4440载体两端含有T7启动子的特点, 设计并构建了针对家蚕核受体FTZ-F1基因的RNA干扰（RNA interference）载体, 将构建好的质粒转入大肠杆菌Escherichia coli H...
研究人员发现运送RNA至细胞线粒体的蛋白（图）
RNA 细胞线粒体 蛋白
2010/8/17
加州大学洛杉矶分校（UCLA）的约翰逊综合癌症中心与化学系、生物化学系以及病理学和实验室医学系的研究人员共同揭示了一种必不可少的蛋白在往返运送RNA至细胞线粒体中的作用。图片来源：Maureen Heaster.
反义试剂是专门为线虫micro RNA研发的。将文章发表在生物医学中心开放阅览杂志《沉默》（Silence）上的研究人员研发出了第一类能够广泛应用在模式生物上的高效和选择性地抑制miRNA的试剂。
Ever since RNA interference was discovered, in 1998, scientists have been pursuing the tantalizing ability to shut off any gene in the body — in particular, malfunctioning genes that cause diseases su...
RNA干涉的原理与应用
RNAi 双链RNA 基因表达沉寂
2009/11/25
介绍了RNA干扰(RNA interference，RNAi)的机理，阐述了RNAi的生物学意义，并具体论述了RNAi的作用，指出RNAi已经成为一种研究基因功能的有力工具，并且有希望在对疾病的防御及治疗中发挥重要的作用。
NS5B与HCV负链RNA 3′末端特异性结合的分析
丙型肝炎病毒(HCV) NS5B 复制体
2008/10/24
NS5B是RNA依赖性RNA聚合酶，在病毒RNA合成过程中起到中心催化酶的作用.在大肠杆菌中表达和提纯了GST-NS5B融合蛋白，应用紫外交联试验（UV cross-linking）检测NS5B与丙型肝炎病毒(HCV)负链RNA 3′末端的结合，确定NS5B是否参与HCV负链RNA 3′末端复制体的形成.NS5B可与HCV负链RNA 3′末端发生结合，这种结合存在量效关系，比与正链RNA 3′UT...
RNA结合蛋白是基因表达的重要调节因子.RNA-蛋白质印迹（Northwestern blot）是近年来国外建立的筛选这类因子的重要方法之一.应用这一方法从肝细胞株HepG2 cDNA文库中成功筛选到乙型肝炎病毒表面抗原转录后调节片段互相作用蛋白表达克隆.结果显示：该蛋白与探针结合特异性强，经三轮筛选后，100%克隆为阳性克隆；PCR和EcoRⅠ酶切初步鉴定, 编码该蛋白的cDNA长约1 kb. ...
《自然》：科学家发现一类新的小RNA分子
RNA分子 编码蛋白
2008/5/16
RNA的重要作用就是真实传达DNA的信息，从而让细胞能够制造出各种蛋白。近年来，分子生物学家越来越多地发现，一类很短的RNA分子同样直接影响着基因编码蛋白过程，比如是哪个基因来编码蛋白，制造多少蛋白。此外，科学家发现一些小RNA在保护遗传物质的完整性方面也扮演着特殊的角色。
RNA干扰的实验方法及应用
实验方法 RNA干扰
2008/3/3
RNA干扰(RNA interference，RNAi)就是把与内源mRNA编码区同源的长度为19～23 bp的外源双链RNA(double stranded RNA，dsRNA)导入细胞中，通过一系列细胞内反应引发细胞中相应mRNA的降解，从而导致特定基因表达沉默的一种技术；是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵，抑制转座子活性及基因表达的监控机制。《Science》和美国科学促进会将RNAi技术...
外源RNA对小鼠白蛋白基因表达及DNaseⅠ敏感性的影响
外源RNA DNaseⅠ 敏感性 小鼠Alb基因
2008/1/29
摘要兔肝RNA诱导培养的小鼠成纤维细胞,大鼠肝RNA注射入小鼠前列腺,用免疫组织化学染色检测外源RNA对小鼠白蛋白基因表达的影响;不同RNA诱导培养的小鼠成纤维细胞,提取细胞核,DNaseⅠ消化,PCR法扩增小鼠白蛋白基因,检测白蛋白基因消化情况。发现外源RNA可促进小鼠白蛋白基因表达并增加该基因DNaseⅠ敏感性。
为建立一hLRH-1表达稳定抑制的细胞系，我们构建了hLRH-1基因靶向的稳定RNA干涉载体(pSineohLRH-1)并导入肝细胞癌细胞BEL-7402。通过半定量RT-PCR分析发现，携有pSineohLRH-1的BEL-7402细胞其hLRH-1基因mRNA的表达抑制率达60%。此外，微阵列法基因表达谱分析结果表明，与未干涉的对照细胞相比，包括一些肿瘤相关的基因如Gadd45β和PTEN在内...
分子遗传学泰斗J. D. Watson于1957年首先对核糖体进行系统的研究。其后0.许多科学家的共同努力，核糖体的结构已经基本研究清楚。然而对核糖体蛋白质的确切功能，却仍然一无所知。1979年以来，本实验室主要从事分离核糖体蛋白质突变体，研究核糖体蛋白质突变对基因表达的影响。发现在S12突变体中，碱性蛋白酶活性下降，而中性蛋白酶活性正常。到目前为止，我们分离鉴定了的枯草杆菌核糖体蛋白质突变体总数...
根据番茄ACC合成酶基因(LE-ACC2)DNA序列，以番茄(Lycopersicon esculentumMill)果实的总DNA为模板，利用PCR技术扩增得到预期大小的该基因编码区内部分DNA序列，插入到质粒载体pGEM-3zf(+)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间后转化E. coliDH-5α，可选出重组子pRE，经酶切，PCR及DNA序列分析证明克隆成功；将pRE上的目的DNA序列以反义方...