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改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离法及膜片钳应用
大鼠 膀胱 平滑肌 膜片钳
2013/11/13
改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离方法，为利用膜片钳技术研究膀胱疾病提供必要的技术平台。 方法 采用木瓜蛋白酶和胶原酶Ⅱ，采用一步法和二步法，分别消化5只新生和成年Wistar大鼠膀胱组织，在膜片钳工作台上分别对平滑肌细胞钠钙交换体电流行全细胞记录。 结果 建立了稳定的新生和成年大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离方法。新生大鼠钠钙交换体(Na+Ca2+ exch...
药物hERG毒性评价是药物成药性早期评价的重要方面之一，也是药物心脏安全性评价的关键指标。针对hERG通道的毒性检测已成为新药研发的必需和先决的条件，是新药申报的必要资料。在先导化合物发现、候选药物确定等药物开发早期阶段检测hERG毒性可有效降低药物研发成本，提高成功率。为更好的开展hERG毒性评价，上海药物所神经药理学研究国际科学家工作站（简称工作站）在已有的基于荧光的高通量筛选技术和传统膜片钳...
建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统,并将其应用于体外心肌细胞膜钙离子通道的研究,验证其应用效果。方法 通过在激光扫描共聚焦显微镜上加装膜片钳装置,采用计算机自动控制技术建立膜片钳与激光扫描共聚焦显微镜的同步实时控制系统；将建立好的装置应用于观察体外雄性大鼠心肌细胞膜钙离子通道,并分析观察结果 。结果 成功建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统；当刺激心肌细胞时,激光扫描共聚...
人参皂苷Rg1对人神经干细胞功能表达的膜片钳研究
人参皂苷Rg1 人神经干细胞 功能表达 膜片钳
2012/11/28
观察人参皂苷Rg1诱导人神经干细胞(neural stem cells of human,hNSCs)的功能表达。 方法:采用全细胞膜片钳技术分析人参皂苷Rg1诱导hNSCs分化7 d时,神经元样细胞的膜电生理特性以及钠、钾离子通道的功能表达。 结果:人参皂苷Rg1(20 mg·L-1)诱导hNSCs分化7 d时,神经元样细胞的膜静息电位为(-45.70±2.63) mV,膜电容为(26.89±1...
微动脉段标本的全细胞膜片钳技术
微动脉 缝隙连接 膜片钳 平滑肌细胞
2012/6/29
介绍一种在微动脉段标本上进行全细胞膜片钳记录的技术。方法 在离体豚鼠耳蜗螺旋动脉(SMA)、小脑前下动脉(AICA)和肠系膜动脉(MA)分支微动脉(直径小于100μm)的原位平滑肌细胞上，应用全细胞膜片钳技术。结果 微动脉段上平滑肌细胞静息膜电位平均值在-25 ~ -37mV之间，细胞膜电容(Cinput)平均值在70 ~250pF之间，均高于消化分离的单个平滑肌细胞。应用缝隙连接...
适于膜片钳技术的大鼠肝Kupffer细胞急性分离和鉴定
适于膜片钳技术 大鼠 肝Kupffer细胞 分离 鉴定
2009/7/30
目的: 建立一种适于膜片钳技术(PCT)的大鼠肝Kupffer细胞的急性分离方法.方法: 经门静脉插管, 用无Ca2+，Mg2+ K-H原位灌注液冲洗后，IV型胶原酶原位循环灌注消化，Percoll不连续密度梯度离心，分离制备大鼠肝Kupffer细胞，选择性贴壁纯化. 用体内、体外吞噬功能(炭素墨水或聚苯乙烯乳珠)实验鉴定制备的肝Kupffer细胞. 用全细胞膜片钳记录技术测定Kupffer细胞电...
离子通道研究技术的最新进展——全自动膜片钳技术
全自动膜片钳技术 离子通道研究技术
2008/5/6
全自动膜片钳技术是离子通道检测技术的最新进展，它具有直接性、高信息量及高精确性的特点。近来在多个方面作出新的突破，如高的实验通量表现，较高的自动化程度、良好的封接质量、微量加样等。目前，该技术在以离子通道为靶标的药物研发，药物毒理测试以及虚拟药筛等方面有广阔的应用前景。本文对全自动膜片钳仪器的原理和技术细节作全面介绍。
适合膜片钳试验的一种外周血嗜酸性粒细胞分离法
2007/7/25
外周血嗜酸性粒细胞(EOS)是变态反应疾病如支气管哮喘、过敏性鼻炎中的一种关键效应细胞[1]，目前国内已开始用膜片钳技术来研究EOS离子通道与其功能的关系，分离高活力而又没有细胞损伤的EOS显得尤为重要，但是免疫磁珠分离法价格昂贵，而用fMLP孵育增加中性粒细胞和EOS密度差的Percoll不连续密度梯度法在红细胞裂解过程中对EOS膜会产生影响，fMLP本身对EOS功能有影响，分离时间过长，不适宜...
膜片钳电生理试验干扰的来源与排除
2007/7/25
在电生理试验中凡影响被观察的生物电信号的其他无关电信号均称为干扰，又名噪声。干扰来自四面八方，无一定规律，要花很大的精力去排除，因此分析并排除干扰是做好膜片钳试验的前提。