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搜索结果: 1-15 共查到医学 shRNA相关记录68条 . 查询时间(0.113 秒)
探讨 shRNA 靶向沉默接触蛋白-1(CNTN1)基因表达对人乳腺癌细胞株 MDA-MB-468 裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法 18 只 4 周龄雄性 BALB/c 裸鼠随机均分为 3 组,收集处于对数生长期的 MDA-MB-468 细胞(空白对照组)、转染无义 shRNA 片段的 MDA-MB-468 细胞(空载体组)及转染 shRNA 载体片段的 MDA-MB-468 细胞(沉默组)分...
探讨甲状腺转录因子(TTF-1)对肺腺癌细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)药物敏感性及细胞上皮间质化的影响。方法将培养后的肺腺癌HCC827细胞分为空载体组、阴性质粒转染(NC-shRNA)组和阳性质粒转染(TTF-1-shRNA)组,通过shRNA干扰技术抑制细胞中的TTF-1基因表达,用流式细胞仪测定转染前后细胞凋亡率和细胞周期变化。不同浓度的吉非替尼(10、20、40、...
制备一种新型的NGR靶向载shRNA脂质体,研究其对大鼠原位胶质瘤的抑制作用。方法 (1)先后制备脂质微球(lipo)、NGR靶向微球(lipo-NGR)和含质粒靶向微球(shBirc5-lipo-NGR),并对各种微球的性质进行表征;(2)免疫组织化学法研究shBirc5-lipo-NGR对大鼠原位胶质瘤模型的靶向性;(3)MRI T2实时监测原位胶质瘤生长情况及观察大鼠生存期。
研究Survivin-shRNA对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞自噬及凋亡的影响。方法:培养视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞,构建Survivin-shRNA载体。按照处理不同分为Survivin-shRNA组、GFP组和CON组。分别采用流式细胞术检测Survivin-shRNA对HXO-RB44细胞凋亡和细胞周期的影响,应用MTT法检测Survivin-shRNA对HXO-RB44细胞活...
构建迁移诱导基因(migration inducing gene 7,MIG7)的逆转录病毒表达载体并测序,初步建立其包装细胞株。方法:根据MIG7已知序列设计合成所需脱氧寡核苷酸序列,并与线性RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体连接。PCR扩增热转化后的连接产物,检测和挑取阳性克隆和阳性菌落,提取质粒后测序,与Gen-Bank中特异性MIG7-shRNA基因序列对...
研究Xklp2靶蛋白(TPX2)shRNA对乳腺癌细胞生长、凋亡、侵袭、迁移能力的影响。方法:乳腺癌细胞MCF-7感染靶向TPX2基因shRNA慢病毒和阴性对照慢病毒,设置为TPX2 shRNA组、shRNA-NC组,把不做慢病毒感染的细胞设为对照组(Control组)。Real time PCR和Western blot测定沉默效果,MTT测定细胞增殖活性,克隆形成实验测定细胞克隆形成能力,流式...
研究shRNA靶向沉默E盒结合锌指蛋白2(zinc finger E-box binding homeobox,ZEB2)表达对肺癌细胞增殖活性的影响。方法:用shRNA-ZEB2慢病毒和shRNA阴性对照慢病毒感染肺癌细胞,Real time PCR和Western blot检测沉默效果。MTT检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中激活型Caspase-...
探讨赖氨酸甲基转移酶SET8对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响。 方法 体外分离培养大鼠VSMC,将VSMC随机分为正常对照组、空质粒组、SET8-shRNA组。应用RT-PCR、Western blot检测SET8和钙黏附蛋白E-cadherin mRNA和蛋白的表达,应用MTT法检测细胞增殖能力,应用Transwell实验检测细胞迁移能力。 结果 SET8-shRNA组与正常对照...
探讨应用超声靶向破坏微泡(UTMD)技术介导shRNA抑制小鼠肝癌细胞株JNK1基因表达的能力。方法 构建并筛选shRNA最佳表达载体。体外培养肝癌细胞Hca-F,共分为5组:A组为空白对照组;B组为shRNA质粒组;C组为脂质体组;D组为超声微泡+超声辐照组;E组为脂质体+超声微泡+超声辐照组。应用倒置荧光显微镜观察转染率;荧光定量PCR检测JNK1的mRNA水平;Western-Blot检测J...
核因子-κB作为重要转录因子,与多种恶性肿瘤的发生发展有着密切联系,直接或间接抑制NF-κBp65的表达可逆转肿瘤细胞生物学行为。构建人核因子-κBp65基因shRNA重组质粒,感染A549细胞并筛选出稳定细胞株,对其迁移、粘附能力进行鉴定。方法 设计并合成人核因子-κBp65的乱序对照序列(scramble)和干扰序列(shRNA)构建重组质粒,在5’端引入一个BamHI位点,3’端引入一个Xh...
已有的研究证明nm23-H1基因是一个重要的肿瘤转移抑制基因,但其抑制肿瘤转移的生化机理尚不完全清楚。Nm23-H1基因结构和功能异常与肿瘤的侵袭转移有密切关系。我们前期已构建了nm23-H1的短发夹RNAshort hairpin RNA, shRNA)载体以及可抵抗此shRNA降解的nm23-H1的cDNA的表达载体,在此基础上我们欲应用基因定点突变技术构建具有不同酶活性并能抵抗此shRNA...
构建大鼠转化生长因子β1(transforming growth factor,TGFβ1)基因RNA干扰慢病毒载体,并观测其对大鼠肝星状细胞HSC-T6 的TGFβ1基因沉默效应与对Ⅰ型胶原α1(alpha-1 type Ⅰ collagen, Col1α1)表达的影响。 方法 针对大鼠TGFβ1基因CDs序列,筛选3个干扰靶点,合成其3对小干扰RNA(siRNA),将各...
构建有效针对人Dystrophin Dp71基因的短发夹RNA(short hairpin RNAshRNA)真核表达载体,并验证其干扰效果。方法:设计合成3对针对人Dystrophin Dp71基因的和1对无同源性的siRNA片段,在两端和中间加上酶切位点和Loop环。将合成的DNA片段插入到干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,经过酶切和测序验证,成功构建人Dp71基因的shRNA和空白对...
构建靶向人Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)分子的shRNA 真核表达载体并检测其对靶分子的干扰效应。方法 根据靶分子COL1A1基因序列, 设计、合成编码其shRNA 的互补寡核苷酸序列, 克隆至线性化的pSilencerTM2.1-U6 neo载体中并对重组质粒进行酶切分析及测序鉴定; 脂质体介导重组质粒转染乳腺癌MDA-MB-231细胞, 经G418筛选获稳定表达细胞株, RT-PCR 及W...
观察超声微泡携单酰基甘油脂肪酶沉默基因(monoacylglycerol lipase short hairpin RNA, MAGL-shRNA)在大鼠肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)组织中转染及对HCC转移的作用。 方法 建立大鼠肝细胞肝癌模型,病理解剖和二维超声验证肝脏成瘤情况。40只SD大鼠完全随机分成4组,分别为PBS液组、MA...

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