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制备一种新型的NGR靶向载shRNA脂质体,研究其对大鼠原位胶质瘤的抑制作用。方法 (1)先后制备脂质微球(lipo)、NGR靶向微球(lipo-NGR)和含质粒靶向微球(shBirc5-lipo-NGR),并对各种微球的性质进行表征;(2)免疫组织化学法研究shBirc5-lipo-NGR对大鼠原位胶质瘤模型的靶向性;(3)MRI T2实时监测原位胶质瘤生长情况及观察大鼠生存期。
研究Xklp2靶蛋白(TPX2)shRNA对乳腺癌细胞生长、凋亡、侵袭、迁移能力的影响。方法:乳腺癌细胞MCF-7感染靶向TPX2基因shRNA慢病毒和阴性对照慢病毒,设置为TPX2 shRNA组、shRNA-NC组,把不做慢病毒感染的细胞设为对照组(Control组)。Real time PCR和Western blot测定沉默效果,MTT测定细胞增殖活性,克隆形成实验测定细胞克隆形成能力,流式...
构建有效针对人Dystrophin Dp71基因的短发夹RNA(short hairpin RNAshRNA)真核表达载体,并验证其干扰效果。方法:设计合成3对针对人Dystrophin Dp71基因的和1对无同源性的siRNA片段,在两端和中间加上酶切位点和Loop环。将合成的DNA片段插入到干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,经过酶切和测序验证,成功构建人Dp71基因的shRNA和空白对...
观察超声微泡携单酰基甘油脂肪酶沉默基因(monoacylglycerol lipase short hairpin RNA, MAGL-shRNA)在大鼠肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)组织中转染及对HCC转移的作用。 方法 建立大鼠肝细胞肝癌模型,病理解剖和二维超声验证肝脏成瘤情况。40只SD大鼠完全随机分成4组,分别为PBS液组、MA...
目的:探讨雄激素受体(androgen receptor,AR)小片段发夹RNAshorthairpin RNAshRNA)通过沉默AR基因对人前列腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法:建立人前列腺癌细胞株22RV1裸鼠移植瘤模型,同时构建针对其AR的shRNA,经酶切导入质粒载体,测序确认后行重组质粒的大量制备。将荷瘤裸鼠随机分为实验组和对照组,待移植瘤体积长至300 mm3左右时,实验组...
构建zeste基因增强子同源物2(EZH2)靶向的小发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探讨抑制EZH2基因表达后其在结直肠癌细胞中的作用。方法 根据EZH2cDNA序列设计具有短发夹结构的两条DNA序列,与载体pGFP-V-RS构建重组表达载体,鉴定后转染至SW480细胞。将其随机分为阴性对照组和基因沉默组,RT-PCR和蛋白质印迹法检测抑制效果,MTT法检测细胞增殖情况。结果 成功构...
构建靶向化学趋化因子受体1(CXCR1)的短发夹小干扰RNAshRNA)质粒表达载体。方法:针对人CXCR1基因的mRNA序列,按RNA干扰靶位点的设计原则,设计并构建靶向CXCR1基因的3个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体,经酶切和测序确认构建成功后,转染胃癌细胞MKN45,RT-PCR和Western blot检测CXCR1 mRNA和蛋白的表达。结果:经酶切和测序证实,3个...
构建膜-细胞骨架联接分子(ezrin)特异的RNA干扰质粒载体。

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